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HOW TO TEST POLYSACCHARIDE

Xi'an Sost Biotech Co.,Ltd | Updated: Jan 04, 2017

How To Test Polysaccharide?

1.试剂Reagent

 

1.1苯酚(AR) Phenol

1.2重蒸水 Redistilled Water

1.3浓硫酸(AR) SulfuricAcid

1.4  5%苯酚溶液:取苯酚加热蒸馏,收集182度馏分,吸取此馏分10ml加水至200ml即可。

5% Phenol Solution: Take heat phenol distillation and distillate collect182 degree, absorb distillation10ml and add water to200ml.

 

2.仪器和用具 Instrument and Appliance

 

2.1电子天平(1/100000) ElectronicBalance

2.2玻璃仪器: 容量瓶 Glass Apparatus: Volumetric Flask

2.3超声波清洗器 Ultrasonic Cleaner

2.4紫外分光光度计 Ultraviolet Spectrophotometer

2.5玻璃比色皿(25px) Glass Cell


 

3、步骤 Process


3.1标准曲线的建立

Established Standard Curves


3.1.1精密称取恒重后的葡萄糖对照品10mg置于100ml容量瓶中, 加入重蒸水溶解并定容。

Accurately measure constant weight Glucose reference substance10mg and add into100ml volumetric flask with heavy steam water dissolved and constant volume.

 

3.1.2用吸管精密吸取上述标准液0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8ml。分别置于具塞刻度试管中,并用蒸馏水补充至2ml,加入5%的苯酚溶液1.0ml,浓硫酸5.0ml,振摇5分钟, 同时作一个空白对照。

Accurately absorb above standard liquid 0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8ml, respectively in Graduated test tube with stopper, add distilled water to2ml, and add1.0ml5% Phenol Solution,  Sulfuric Acid5.0ml, Vibration wave5 minutes, make a blank control at the same time.

 

3.1.3在沸水浴中加热15分钟, 取出, 冷水冷却30分钟。

Heating for15 minutes in a boiling water, take out and cooling in cold water for30 minutes.

 

3.1.4紫外可见分光光度计在波长490nm处测定吸光度。

Uv-vis spectrophotometer absorbance at490 nm wavelength.

 

3. 1 .5 以吸光度为纵坐标, 葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线。

Absorbance as ordinate, glucose concentration as abscissa, drawing standard curve.


3.2样品的测定 Sample Test

 

3.2. 1 精密称取样品0. 20g,置索氏提取器中, 用80% 乙醇1 0ml回流2h, 残渣用

80%乙醇洗至无色,,继续用水100ml回流2h,反复洗至250ml容量瓶中,定容, 摇匀成为样品液。

Accurately measure sample 0.2g into soxhlet extractor, with10 ml80% ethanol reflux2 h, and Residue with80% ethanol to wash to colorless, then with100ml water reflux2h,

repeated washing into250 ml volumetric flask, constant volume, Shake well to the sample liquid.


3.2.2 精密吸取上述溶液2.0ml置具塞试管中, 照标准曲线项下“加入5%的苯酚溶液~”起,依法操作

Accurately absorb above standard liquid 2.0ml, add into Graduated test tube with stopper, According to the standard curve"add 5% Phenol Solution",

 

3.2.3 在标准曲线上查出样品吸光度值对应的毫克数。

Find out the sample number of mg absorbance values


4、计算 Calculate

 

M--SampleVolume(g);

V-- Dilution ratio;

A-- Sample absorbance corresponding mg


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